Multiplex-CRISPR-Cas9-Mutagenese

Multiplex-CRISPR-Cas9-Mutagenese ist eine fortschrittliche Technik der Genomeditierung, die die CRISPR-Cas9-Technologie verwendet, um mehrere Gene oder Genomregionen gleichzeitig zu verändern (mutieren). Diese Methode bietet erhebliche Vorteile für die Untersuchung komplexer genetischer Netzwerke und für Anwendungen in der Biotechnologie, da sie die gleichzeitige Bearbeitung mehrerer Zielsequenzen ermöglicht.

Bei der Multiplex-Mutagenese werden mehrere gRNAs entworfen, die jeweils spezifische DNA-Sequenzen in verschiedenen Genen oder verschiedenen Regionen desselben Gens anvisieren. Diese gRNAs werden oft in einem einzigen Plasmid oder in mehreren Plasmiden eingebracht, die gleichzeitig in die Zelle eingeführt werden.

Nach der Einführung in die Zelle führt das Cas9-Protein in Anwesenheit der verschiedenen gRNAs präzise Schnitte an mehreren spezifischen Stellen im Genom durch. Dies kann zu verschiedenen Arten von genetischen Veränderungen führen, wie Deletionen, Insertionen oder Punktmutationen, abhängig von der Art der Reparatur, die nach dem DNA-Schnitt erfolgt.